相差显微镜

相差显微镜定义

• 未染色的活细胞几乎不吸收光。光吸收差会导致图像强度分布的差异非常小。这使得细胞在明场显微镜中几乎看不到或根本看不到。相差显微镜是一种光学显微镜技术，可将穿过透明标本的光的相移转换为图像中的亮度变化。
• 它是1934年由荷兰物理学家Frits Zernikeshou次描述的。

相差显微镜原理

当光穿过细胞时，会发生小的相移，这是人眼看不见的。在相衬显微镜中，这些相移被转换为幅度变化，可以观察到图像对比度的差异。

相差显微镜的工作

1. 钨-卤素灯产生的部分相干照明被引导通过一个集光镜，并聚焦在位于子级聚光镜前焦平面上的专用环空（标记为聚光镜环空）上。
2. 穿过环形空间的波前照亮了样本，并且未偏移或通过样本中存在的结构和相位梯度而被相位衍射和延迟。
3. 由物镜收集的未衍射和衍射光在后焦平面被相位板隔离，并聚焦在中间像平面上，从而形成在目镜中观察到的zui终相衬像。