扫描电子显微镜(SEM)如何工作?

  • 电子和电磁透镜的光源来自放置在柱顶的钨丝灯,与透射电子显微镜的钨丝灯相似。
  • 在将热能施加到电子源后,电子会发射出来,并以快速运动的方式移动到阳极,阳极带有正电荷。
  • 电子束从样品表面激活高能级的初级散射(主)电子和低能级的次级电子的发射。电子束与样品相互作用产生信号,该信号给出有关样品表面形貌和成分的信息。
  • 样品无需特殊处理即可在SEM下进行可视化,甚至可以直接检查风干样品。但是,微生物标本需要固定,脱水和干燥,以在暴露于高真空显微镜下时保持细胞的结构特征并防止细胞崩溃。
  • 样品被安装并涂有薄层重金属元素,以允许电荷在样品表面上的空间散射,从而可以更好地产生具有较高清晰度的图像。
  • 通过在显微镜的薄部分上来回倾斜电子束来实现此显微镜的扫描。当电子到达标本时,表面会释放出微小的电子aw,称为二次电子,然后被特殊的检测器捕获。
  • 当二次电子到达并进入探测器时,它们撞击闪烁体(一种被带电粒子或高能光子撞击时发出荧光的发光材料)。这会发出闪光,然后通过光电倍增管将其转换为电流,从而向阴极射线管发送信号。这将产生看起来像可以观看和拍摄的电视图像的图像。
  • 进入检测器的二次电子的数量由样品的性质高度定义,即凸起的表面接收大量的电子,进入检测器,而凹陷的表面到达表面的电子更少,因此进入检测器的电子更少。
  • 因此,凸起的表面在屏幕上看起来更亮,而凹陷的表面在屏幕上看起来更暗。