荧光显微镜原理

  1. 大多数细胞成分是无色的,在显微镜下无法清楚地区分。荧光显微镜的基本前提是用染料对组分进行染色。
  2. 荧光染料,也称为荧光团或荧光染料,是吸收给定波长(通常为UV)的激发光,并在短暂的延迟后发出更长波长的光的分子。吸收和发射之间的延迟可以忽略不计,通常约为纳秒。
  3. 然后可以从激发光中滤出发射光以揭示荧光团的位置。
  • 荧光显微镜使用强度更高的光照射样品。该光激发样品中的荧光物质,然后发出更长波长的光。
  • 产生的图像基于第二种光源或荧光物质的发射波长,而不是zui初用于照明和激发样品的光。

加工

激发波长的光通过物镜聚焦在样品上。样品发出的荧光通过物镜聚焦在检测器上。由于大多数激发光都透射过样品,因此只有反射的激发光与发射光一起到达物镜。

形式

荧光显微镜”是指使用荧光生成图像的任何显微镜,无论是诸如落射荧光显微镜这样的更简单的装置,还是诸如共焦显微镜之类的更复杂的设计,其都使用光学切片来获得更好的分辨率。荧光图像。

使用的大多数荧光显微镜是落射荧光显微镜,其中荧光团的激发和荧光的检测是通过相同的光路(即通过物镜)完成的。