荧光显微镜原理

1. 大多数细胞成分是无色的，在显微镜下无法清楚地区分。荧光显微镜的基本前提是用染料对组分进行染色。
2. 荧光染料，也称为荧光团或荧光染料，是吸收给定波长（通常为UV）的激发光，并在短暂的延迟后发出更长波长的光的分子。吸收和发射之间的延迟可以忽略不计，通常约为纳秒。
3. 然后可以从激发光中滤出发射光以揭示荧光团的位置。

• 荧光显微镜使用强度更高的光照射样品。该光激发样品中的荧光物质，然后发出更长波长的光。
• 产生的图像基于第二种光源或荧光物质的发射波长，而不是zui初用于照明和激发样品的光。

加工

激发波长的光通过物镜聚焦在样品上。样品发出的荧光通过物镜聚焦在检测器上。由于大多数激发光都透射过样品，因此只有反射的激发光与发射光一起到达物镜。

形式

“荧光显微镜”是指使用荧光生成图像的任何显微镜，无论是诸如落射荧光显微镜这样的更简单的装置，还是诸如共焦显微镜之类的更复杂的设计，其都使用光学切片来获得更好的分辨率。荧光图像。

使用的大多数荧光显微镜是落射荧光显微镜，其中荧光团的激发和荧光的检测是通过相同的光路（即通过物镜）完成的。