显微镜的种类

微生物实验室可使用各种类型的显微镜显微镜具有多种用途和修改形式,有助于其实用性。

光学显微镜。实验室中使用的普通光学显微镜称为复合显微镜,因为它包含两种类型的可放大物体的透镜。zui靠近眼睛的晶状体称为目镜,而zui靠近物体的晶状体称为物镜。大多数显微镜在其底座上都有一个称为聚光镜的设备,该设备将光线会聚为强光束。甲隔膜位于所述冷凝器控制光通过它的到来的量。在光学显微镜上可以找到粗调和精调(图)。

为了放大物体,光线会通过舞台上的一个开口投射,然后撞击物体然后进入物镜。创建一个图像,该图像成为用于放大该图像的眼镜的对象。因此,用显微镜可能得到的总放大倍数是物镜实现的放大倍数乘以目镜获得的放大倍数。

复合光学显微镜通常包含四个物镜:扫描透镜(4X),低倍透镜(10X),高倍透镜(40 X)和油浸透镜(100 X)。使用放大10倍的目镜,扫描镜头的总放大倍数将为40 X,低倍镜的放大倍数为100 X,高倍镜的放大倍数为400 X,油浸镜头的放大倍数为1000X。大多数显微镜都是近焦的。这个术语意味着当一个显微镜从一个物镜切换到下一个物镜时,显微镜将保持聚焦。

在显微镜下清楚地看到两个项目作为独立对象的能力称为显微镜的分辨率。分辨率部分取决于用于观察的光的波长。可见光的波长约为550nm,而紫外光的波长约为400nm或更小。显微镜的分辨率随着波长的减小而增加,因此紫外线使人们能够检测可见光看不到的物体。镜头的分辨力是指该镜头可以看到的zui小物体的尺寸。分辨力基于所用光的波长和透镜的数值孔径。的数值孔径(NA)指可以进入透镜的zui宽的光锥;NA刻在物镜的侧面。

如果用户要清楚地看到物体,则必须有足够的光进入物镜。对于现代显微镜,对于扫描,低倍和高倍镜头而言,进入物镜并不是问题。但是,油浸镜头非常狭窄,大多数光线都无法射中。因此,该对象的观看效果很差且没有分辨率。为了提高油浸镜头的分辨率,在镜头和载玻片之间放了一滴浸油(图)。浸入的油具有与载玻片相同的抗弯能力(折射率),因此当浸入油穿过载玻片到达油并到达物镜时,它保持光线成一直线,即浸油镜片。随着进入物镜的光量的增加,物体的分辨率提高,人们可以观察到像细菌一样小的物体。分辨率在其他类型的显微镜中也很重要。

其他光学显微镜。除了熟悉的复合显微镜外,微生物学家还可以将其他类型的显微镜用于特定目的。这些显微镜可以观察光学显微镜无法看到的物体。

另一种可选的显微镜是暗视野显微镜,用于观察活的螺旋体,例如引起梅毒的螺旋体。该显微镜包含一个特殊的聚光器,该聚光器会散射光并使它以一定角度从样本反射回来。在深色背景上可以看到一个轻的物体。

第二种替代显微镜是相衬显微镜。该显微镜还包含特殊的聚光器,它们会“异相”投射光,并使其以不同的速度穿过物体。用该显微镜可以清楚地看到未染色的活生物体,并且可以用该仪器看到内部细胞部分,例如线粒体,溶酶体和高尔基体。

荧光显微镜利用紫外光作为其光源。当紫外线照射到物体上时,它会激发物体的电子,并且它们发出各种阴影的光。由于使用紫外线,因此物体的分辨率提高。一种称为荧光抗体技术的实验室技术使用荧光染料和抗体来帮助识别未知细菌。

电子显微镜。电子显微镜中使用的能源是电子束。由于光束的波长非常短,因此光束会撞击其路径中的大多数物体,并显着提高显微镜的分辨率。用此仪器可以看到病毒和一些大分子。电子在真空中传播,以避免与偏转的空气分子接触,磁铁将光束聚焦在要观察的物体上。在监视器上创建图像并由技术人员查看。

电子显微镜的更传统形式是透射电子显微镜(TEM)。要使用此仪器,可将超薄的微生物或病毒切片放在线栅上,然后在观察之前用金或钯染色。样品的密集涂层部分使电子束偏转,图像上同时出现了暗区和亮区。

的扫描电子显微镜(SEM)是在更现代的形式电子显微镜。尽管此显微镜的放大率低于TEM,但SEM允许对微生物和其他物体进行三维观察。使用整个物体,并使用金或钯染色。

光学显微镜。(a)普通光学显微镜的重要部分。(b)浸油如何收集更多的光以供显微镜使用。

为了放大物体,光线会通过舞台上的一个开口投射,然后撞击物体然后进入物镜。创建一个图像,该图像成为用于放大该图像的眼镜的对象。因此, 用显微镜可能得到的  总放大倍数是物镜实现的放大倍数乘以目镜获得的放大倍数。

复合光学显微镜通常包含四个  物镜:  扫描透镜(4X),低倍透镜(10X),高倍透镜(40 X)和油浸透镜(100 X)。使用放大10倍的目镜,扫描镜头的总放大倍数为40 X,低倍镜的放大倍数为100 X,高倍镜的放大倍数为400 X,油浸镜头的放大倍数为1000X。大多数显微镜都是近  焦的。这个术语意味着当一个显微镜从一个物镜切换到下一个物镜时,显微镜将保持聚焦。

在显微镜下清楚地看到两个项目作为独立对象的能力称为显微镜的  分辨率  。分辨率部分取决于用于观察的光的波长。可见光的波长约为550nm,而紫外光的波长约为400nm或更小。显微镜的分辨率随着波长的减小而增加,因此紫外线使人们能够检测可见光看不到的物体。 镜头的  分辨力是指该镜头可以看到的zui小物体的尺寸。分辨力基于所用光的波长和透镜的数值孔径。的数值孔径(NA) 指可以进入透镜的zui宽的光锥;NA刻在物镜的侧面。

如果用户要清楚地看到物体,则必须有足够的光进入物镜。对于现代显微镜,对于扫描镜,低倍镜和高倍镜而言,进入物镜并不是问题。但是,油浸镜头非常狭窄,大多数光线都无法射中。因此,该对象的观看效果很差且没有分辨率。为了提高油浸镜头的分辨率,在 镜头和载玻片之间放置一滴  浸油(图  1)。 )。浸入的油具有与载玻片相同的抗弯能力(折射率),因此当浸入油穿过载玻片到达油并到达物镜时,油会保持在一条直线上,即浸油镜片。随着进入物镜的光量的增加,物体的分辨率提高,人们可以观察到像细菌一样小的物体。分辨率在其他类型的显微镜中也很重要。

其他光学显微镜。 除了熟悉的复合显微镜外,微生物学家还可以将其他类型的显微镜用于特定目的。这些显微镜可以观察光学显微镜无法看到的物体。

另一种显微镜是  暗视野显微镜,用于观察活的螺旋体,例如引起梅毒的螺旋体。该显微镜包含一个特殊的聚光器,该聚光器会散射光并使它以一定角度从样本反射回来。在深色背景上可以看到一个轻的物体。

第二种替代显微镜是  相衬显微镜。 该显微镜还包含特殊的聚光器,它们会“异相”投射光,并使其以不同的速度穿过物体。用该显微镜可以清楚地看到未染色的活生物体,并且可以用该仪器看到内部细胞部分,例如线粒体,溶酶体和高尔基体。

该  荧光显微镜  利用紫外光作为其光源。当紫外线照射到物体上时,它会激发物体的电子,并且它们发出各种阴影的光。由于使用紫外线,因此物体的分辨率提高。一种称为荧光抗体技术的实验室技术采用荧光染料和抗体来帮助识别未知细菌。

电子显微镜。电子显微镜中  使用的能源是  电子  束。由于光束的波长非常短,因此光束会撞击其路径中的大多数物体,并显着提高显微镜的分辨率。用此仪器可以看到病毒和一些大分子。电子在真空中传播,以避免与偏转的空气分子接触,磁铁将光束聚焦在要观察的物体上。在监视器上创建图像并由技术人员查看。

电子显微镜的更传统形式是  透射电子显微镜(TEM)。 要使用此仪器,可将超薄的微生物或病毒切片放在线栅上,然后在观察之前用金或钯染色。样品的密集涂层部分使电子束偏转,图像上同时出现了暗区和亮区。

的  扫描电子显微镜(SEM)  是在更现代的形式电子显微镜。尽管该显微镜的放大率低于TEM,但SEM允许对微生物和其他物体进行三维观察。使用整个物体,并使用金或钯染色。