荧光观察所需的设备

随着生命科学研究的进步,用于观察处于生命状态的细胞和蛋白质的技术也得到了发展。荧光观察在此过程中发挥了重要作用。
该技术使用荧光染料或蛋白质作为标记来强调和投射目标区域。在特定的光(激发光)发射到物质的分子后,光能被吸收,其中的电子被激发。然后,在返回基态的过程中发出称为荧光的光。

利用这种激发电子的现象,荧光显微镜在其他设备中使用光源,物镜和荧光滤光片以使特定波长的光通过。

选择合适的荧光滤光片对于获得更好的图像很重要。滤光片由激发滤光片和来自光源的特定波长的光通过,该发射滤光片使样品发出的荧光通过。还包括分色镜以反射特定波长的光并使不同波长的光通过以将激发光与荧光分离。
zui近,每个制造商都根据荧光试剂的特性提供了荧光滤光片组(荧光滤光片立方体),因此用户可以根据其标本选择合适的组合。

选择荧光滤光片的要点

在选择荧光滤光片组(荧光滤光片立方体)时,用户必须使荧光染料的特性与该激发和发射滤光片的波长范围紧密匹配。每个过滤器的特征如下:

  • -励磁过滤器

  • 根据要支持的光的波长带的宽度,有窄带和宽带滤波器。基本上,频带越宽,您可以获得的图像越明亮。但是,通常使用窄带滤波器来减少对活体样品的损害。

     

  • -排放过滤器

  • 这类滤波器大致分为长通(LP)滤波器,短通(SP)和带通(BP)滤波器。LP滤镜仅透射比特定波长更长的波长,而SP滤镜仅透射比特定波长短的波长。BP滤镜仅透射特定波长带中的光。
    当使用单一荧光试剂时,可以通过使用LP滤镜获得更明亮的图像。另一方面,当使用几种荧光染料时,可以通过使用不同的BP滤镜获得每种荧光染料的图像。